高純度保障:經CD31/PECAM-1免疫熒光鑒定,純度≥90%,附完整質檢報告
無菌保障體系:通過14天支原體/細菌/真菌多重檢測,HIV-1/HBV/HCV陰性認證
組織特異性:精準分離自肺動脈干內層,完整保留天然血管功能特性
細胞形態
呈現典型"鋪路石"狀單層多角形分布,完-美模擬體內血管內皮屏障結構,為研究血管通透性調節提供理想模型。
增殖能力
可穩定傳代2-3代,建議接種密度為5×10? cells/cm2,滿足短期實驗需求(如血管生成研究、炎癥反應模擬等)。
冷凍保存
采用程序降溫+含DMSO保護液的標準化流程,解凍后細胞活力≥85%,確保實驗重復性。
雙酶定向消化技術
胰蛋白酶(0.25%)+ 膠原酶Ⅳ(200U/mL)聯合處理
37℃振蕩消化30min,精準分離內皮層
差速貼壁法去除成纖維細胞污染(貼壁時間差15min)
七維質檢體系
形態學鑒定:倒置顯微鏡觀察典型內皮細胞特征
表面標記檢測:CD31/CD34流式細胞術驗證
功能驗證:乙?;疞DL攝取實驗確認內皮特性
微生物檢測:PCR+培養法雙重驗證無菌狀態
活力檢測:臺盼藍排除法確保細胞活性
遺傳穩定性:STR基因型分析排除交叉污染
交叉污染檢測:ISO認證細胞庫比對確認種屬特異性
血管生物學研究
肺動脈高壓模型構建(hypoxia/PDGF-BB誘導)
內皮屏障功能調控(VEGF/TNF-α刺激實驗)
一氧化氮合成途徑研究
藥物篩選平臺
抗血管新生藥物測試(Matrigel管形成實驗)
血栓調節藥物開發(凝血酶敏感性檢測)
納米藥物遞送系統靶向性驗證
疾病機制探究
慢性阻塞性肺?。–OPD)相關內皮損傷
新冠-肺炎肺血管微血栓形成研究
糖尿病血管并發癥模型構建
專用培養基CM-M343
基礎成分:DMEM/F12 + 10%優質FBS
生長因子:bFGF(5ng/mL)+ EGF(2ng/mL)
保護添加劑:谷氨酰胺(2mM)+ 抗氧化劑(0.5mM)
培養建議
包被處理:PLL(0.1mg/mL)或明膠(0.1%)預處理培養器皿
換液策略:初始48h靜置培養,之后每2天半量換液
傳代時機:當細胞融合度達80-90%時,用0.25%胰酶消化