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UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)在生物反應器中的大規模培養技術優化

更新時間:2025-08-14  |  點擊率:61

UMNSAH/DF-1細胞是源自10日齡家雞胚胎的自發永生化雞胚成纖維細胞株,經原代分離及長期傳代培養篩選獲得。該細胞株兼具成纖維細胞的典型特征與永生化細胞的穩定增殖能力,在生物醫學研究中展現出獨-特優勢,尤其適用于病毒學研究、重組蛋白表達及疫苗生產等領域。

UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細胞特性

基礎屬性

種屬:家雞(Gallus gallus domesticus

細胞形態:成纖維細胞樣,呈梭形或星形貼壁生長

生長特性:接觸抑制明顯,但永生化特性保障長期傳代穩定性

生物安全等級:BSL-1

關鍵優勢

非轉化性安全:軟瓊脂集落形成試驗證實無致瘤性(免疫缺陷小鼠模型及半固體培養基中均未觀察到腫瘤形成)

溫度敏感性可控:專為禽類體溫設計(38-40℃),39℃為最佳培養溫度,避免37℃培養導致的狀態衰退

高穩定性:經超過30代傳代驗證,基因型與表型保持高度一致

培養指南

培養體系

基礎培養基:DMEM(PM150210)

血清補充:10% FBS(164210)

抗生素:1%雙抗(PB180120)

氣體環境:5% CO? + 95%空氣

推薦傳代比例:1:3至1:8(每2-3天)

關鍵操作要點

溫度控制

必須使用專用培養箱(38-40℃),溫度波動易誘發細胞空泡化

收貨后可能出現短暫空泡,穩定培養2-3代可恢復

凍存與復蘇

凍存液配方:55%基礎培養基 + 40%FBS + 5%DMSO

液氮長期保存,復蘇時快速融化并離心去除DMSO

換液頻率:每2-3天更換新鮮培養基,維持營養供應

應用領域

病毒學研究

作為禽類病毒(如禽-流感病毒、馬立克氏病病毒)增殖的優選基質

支持病毒滴度測定與疫苗株篩選

重組蛋白生產

高表達效率適用于禽源蛋白(如卵清蛋白、干擾素)的規模化制備

基因功能研究

適用于CRISPR/Cas9基因編輯及穩定細胞系構建

疫苗開發

作為重組病毒載體疫苗的生產平臺(如腺病毒載體)

質量控制

細胞身份驗證:STR基因分型與種屬特異性PCR確認

微生物檢測:無菌、支原體、病毒病原體陰性

活力保證:復蘇后存活率≥90%,傳代穩定性驗證≥10代

來源追溯:ATCC保藏編號CRL-12203,全程可溯源

注意事項

避免37℃培養,建議配置專用培養箱

傳代時消化時間控制在2-3分鐘,避免過度刮取損傷細胞

凍存管標注清晰,嚴格遵循液氮保存規范

細胞信息

產品編號:UMNSAH/DF-1

保藏機構:ATCC(CRL-12203)

推薦配套試劑

專用培養基套裝(含DMEM+FBS+雙抗)

細胞凍存液(預混型)

  1. UMNSAH/DF-1細胞以其獨-特的溫度適應性和非致瘤特性,成為禽類細胞模型中的標-桿工具。嚴格遵循本指南操作,可最大限度發揮其在科研與工業應用中的價值。